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到了目前為止,我們能夠常見(jiàn)到的幾種ELISA方法有測(cè)定抗體的間接法,測(cè)定抗原的雙抗體夾心法和測(cè)定抗原的競(jìng)爭(zhēng)法等。我公司所供應(yīng)的試劑產(chǎn)品擁有的全面的技術(shù)服務(wù)讓客戶(hù)用的放心,我司從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過(guò)程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。
執(zhí)行ELSIA實(shí)驗(yàn)的目的與依據(jù)
以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上,形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原,稱(chēng)為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反 應(yīng)后,作用于底物使之呈色,根據(jù)顏色的有無(wú)和深淺,定位或定量抗原/抗體。ELISA 法是免疫酶技術(shù)的一種,其特點(diǎn)是利用聚苯乙烯微量反應(yīng)板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應(yīng)和酶促反應(yīng)都在其中進(jìn)行。在每次反應(yīng)后都要反復(fù)洗 滌,這既保證了反應(yīng)的定量關(guān)系,也避免了末反應(yīng)的游離抗體/抗原的分離步驟。在ELISA 法中。酶促反應(yīng)只進(jìn)行一次,而 抗原、抗體的免疫反應(yīng)可進(jìn)行一次或數(shù)次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進(jìn)行免疫反應(yīng)。
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每種試劑都有其*反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),會(huì)造成整板本底高,陽(yáng)性率高。
·精密度:一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線(xiàn)性范圍。
·安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性。
·經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過(guò)大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場(chǎng)價(jià)格比較合理。
常因樣品采集、貯存、處理不當(dāng)造成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝集不全等。溶血標(biāo)本,紅細(xì)胞溶解破裂,釋放出血紅素形成,而血紅素中的鐵卟啉是過(guò)氧化物酶的類(lèi)似物,以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
在血標(biāo)本采集處理時(shí)應(yīng)小心,在冰箱中保存不易過(guò)久。
因我司ELISA試劑盒擁有多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn)匯集,從而使得許多朋友對(duì)我公司產(chǎn)品的信賴(lài),非常感謝朋友們的支持相伴!
許多朋友們?cè)谫?gòu)買(mǎi)的過(guò)程中,考慮的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性,偏向于進(jìn)口產(chǎn)品,也都是因?yàn)檫M(jìn)口產(chǎn)品質(zhì)量的保障。我公司有進(jìn)口有國(guó)產(chǎn)的,代理,在成立至今的這五年中,得到了各大科研單位的認(rèn)可,產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)驗(yàn)證,實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性強(qiáng)。
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體--聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。